1. Helburua: Prozedura honek eragiketa aseptikoetarako eta gela esterilen babeserako prozedura estandarizatu bat eskaintzea du helburu.
2. Aplikazio-eremua: proba biologikoen laborategia
3. Arduraduna: QC gainbegiralea
4. Definizioa: Bat ere ez
5. Segurtasun neurriak
Eragiketa aseptikoak zorrotz egin behar dira kutsadura mikrobianoa saihesteko; operadoreek UV lanpara itzali behar dute gela esterilera sartu aurretik.
6. Prozedurak
6.1. Gela esterilak ebakuntza-gela esteril bat eta buffer-gela bat izan behar ditu. Ebakuntza-gela esterilaren garbitasunak 10000 klasea izan behar du. Barruko tenperatura 20-24 °C-tan mantendu behar da eta hezetasuna % 45-60an. Banku garbiaren garbitasunak 100 klasea izan behar du.
6.2. Gela esterila garbi mantendu behar da, eta guztiz debekatuta dago hondakinak pilatzea kutsadura saihesteko.
6.3. Zorrotz saihestu esterilizatzeko ekipo eta hazkuntza-ingurune guztien kutsadura. Kutsatuta daudenek erabiltzeari utzi beharko liokete.
6.4. Gela esterilak desinfektatzaile kontzentrazio egokia izan behar du, hala nola % 5eko kresol disoluzioa, % 70eko alkohola, % 0,1eko klormetionina disoluzioa, etab.
6.5. Gela esterilak aldizka esterilizatu eta desinfektatzaile egokiarekin garbitu behar dira, gela esterilaren garbitasunak baldintzak betetzen dituela ziurtatzeko.
6.6. Gela esterilera eraman behar diren tresna, tresna, plater eta bestelako elementu guztiak ondo bildu eta metodo egokiekin esterilizatu behar dira.
6.7. Gela esterilera sartu aurretik, langileek eskuak xaboiarekin edo desinfektatzailearekin garbitu behar dituzte, eta ondoren, laneko arropa bereziak, oinetakoak, txapelak, maskarak eta eskularruak jantzi behar dituzte gela esterilera sartu aurretik (edo eskuak berriro % 70eko etanolarekin garbitu). Eragiketak bakterioen ganberan egin behar dira.
6.8. Gela esterila erabili aurretik, gela esterileko ultramore-lanpara piztuta egon behar da irradiazio eta esterilizaziorako 30 minutu baino gehiagoz, eta garbiketa-mahaia piztuta egon behar da airea botatzeko aldi berean. Eragiketa amaitutakoan, gela esterila garaiz garbitu eta gero 20 minutuz esterilizatu behar da argi ultramorearekin.
6.9. Ikuskatu aurretik, proba-laginaren kanpoko ontzia osorik mantendu behar da eta ez da ireki behar kutsadura saihesteko. Ikuskatu aurretik, erabili % 70eko alkohola duten kotoi-bolatxoak kanpoko gainazala desinfektatzeko.
6.10. Eragiketa bakoitzean, kontrol negatibo bat egin behar da eragiketa aseptikoaren fidagarritasuna egiaztatzeko.
6.11. Bakterioen likidoa xurgatzen duzunean, xurgatze-bola bat erabili behar duzu xurgatzeko. Ez ukitu lastotxoa zuzenean ahoarekin.
6.12. Txertatze-orratza sugarraren bidez esterilizatu behar da erabili aurretik eta ondoren. Hoztu ondoren, kultura txertatu daiteke.
6.13. Lastotxoak, probeta-hodiak, Petri plakak eta likido bakterianoa duten beste tresnak % 5eko Lysol disoluzioa duen esterilizatzeko ontzi batean busti behar dira desinfektatzeko, eta atera eta 24 ordu igaro ondoren garbitu.
6.14. Mahaian edo zoruan likido bakterianoa isurtzen bada, berehala bota behar da % 5eko azido karboliko disoluzioa edo % 3ko Lysol kutsatutako eremuan gutxienez 30 minutuz tratatu aurretik. Laneko arropak eta txanoak likido bakterianoarekin kutsatuta daudenean, berehala kendu eta garbitu behar dira presio handiko lurrun-esterilizazioaren ondoren.
6.15. Bakterio biziak dituzten elementu guztiak desinfektatu egin behar dira txorrotaren azpian garbitu aurretik. Zorrozki debekatuta dago estolderia kutsatzea.
6.16. Gela esterilean dauden kolonia kopurua hilero egiaztatu behar da. Mahai garbia irekita duzula, hartu 90 mm-ko barne-diametroa duten petri plaka esteril batzuk, eta injektatu aseptikoki 15 ml inguru urtutako eta 45 °C-ra hoztutako agar nutritiboaren hazkuntza-ingurunetik. Solidotu ondoren, jarri hankaz gora 30 eta 35 °C-tan. Inkubatu 48 orduz ℃-ko inkubagailu batean. Esterilitatea egiaztatu ondoren, hartu 3 eta 5 plaka eta jarri lan-posizioaren ezkerrean, erdian eta eskuinaldean. Tapa ireki eta 30 minutuz agerian utzi ondoren, jarri hankaz gora 30 eta 35 °C-ko inkubagailu batean 48 orduz eta atera itzazu. Aztertu. 100 klaseko eremu garbi batean, plakan dauden bakterioen batez besteko kopurua ez da kolonia 1 baino handiagoa izan behar, eta 10000 klaseko gela garbi batean, batez besteko kopurua ez da 3 kolonia baino handiagoa izan behar. Muga gainditzen bada, gela esterila ondo desinfektatu behar da ikuskapen errepikatuek baldintzak betetzen dituzten arte.
7. Kontsultatu "Droga-ikuskapen higienikorako metodoak" eta "Txinako sendagai-ikuskapenerako jarduketa-jardunbide estandarrak" ataletako (Esterilitatu-ikuskapen metodoa).
8. Banaketa Saila: Kalitate Kudeaketa Saila
Gela garbiaren gidalerro teknikoak:
Ingurune esteril bat eta material esterilak lortu ondoren, egoera esteril bat mantendu behar dugu mikroorganismo ezagun espezifiko bat aztertzeko edo haien funtzioak erabiltzeko. Bestela, kanpoko hainbat mikroorganismo erraz nahas daitezke. Kanpoko mikroorganismo garrantzitsuen nahasketaren fenomenoari bakterio kutsatzaileak deitzen zaio mikrobiologian. Kutsadura saihestea teknika kritikoa da lan mikrobiologikoan. Alde batetik, esterilizazio osoa eta bestetik, kutsadura saihestea teknika aseptikoaren bi alderdi dira. Horrez gain, aztergai diren mikroorganismoak, batez ere mikroorganismo patogenoak edo naturan existitzen ez diren genetikoki diseinatutako mikroorganismoak, gure ontzi esperimentaletatik kanpoko ingurunera ihes egitea eragotzi behar dugu. Helburu horietarako, mikrobiologian, neurri asko daude.
Gela esterila normalean mikrobiologia laborategian bereziki prestatutako gela txiki bat da. Xaflekin eta beiraz eraiki daiteke. Eremua ez da oso handia izan behar, 4-5 metro koadro ingurukoa, eta altuera 2,5 metro ingurukoa izan behar da. Gela esterilaren kanpoaldean buffer gela bat prestatu behar da. Buffer gelako atea eta gela esterilaren atea ez dira norabide berean egon behar, aire-fluxuak bakterio desberdinak sar ez ditzan. Bai gela esterilak bai buffer gelak hermetikoak izan behar dute. Barruko aireztapen ekipoek airea iragazteko gailuak izan behar dituzte. Gela esterilaren zorua eta paretak leunak izan behar dira, zikinkeria sartzeko zailak eta garbitzeko errazak. Laneko gainazala laua izan behar da. Bai gela esterilak bai buffer gelak argi ultramoreekin hornituta daude. Gela esterileko argi ultramoreak laneko gainazaletik metro 1era daude. Gela esterilera sartzen diren langileek arropa eta txano esterilizatuak eraman behar dituzte.
Gaur egun, mikrobiologia lantegietan daude gela esterilak gehienbat, laborategi orokorrek, berriz, mahai garbiak erabiltzen dituzte. Mahai garbiaren funtzio nagusia aire-fluxu laminarreko gailua erabiltzea da, lan-gainazalean dauden mikroorganismoak barne, hauts txikiak kentzeko. Gailu elektrikoak airea HEPA iragazkitik igarotzen uzten du eta gero lan-gainazalera sartzen da, lan-gainazala beti aire esterilaren fluxuaren kontrolpean egon dadin. Gainera, kanpoko aldean abiadura handiko aire-gortina bat dago, kanpoko bakterioen airea sartzea saihesteko.
Baldintza zailetako lekuetan, egurrezko kaxa esterilak ere erabil daitezke mahai garbiaren ordez. Kaxa esterilak egitura sinplea du eta erraz mugitzen da. Bi zulo ditu kaxaren aurrealdean, eta horiek martxan ez dagoenean bultza-tiratzeko ateek blokeatzen dituzte. Besoak luzatu ditzakezu martxan dagoen bitartean. Aurrealdeko goiko aldea beiraz hornituta dago barne funtzionamendua errazteko. Ultramore lanpara bat dago kaxaren barruan, eta tresnak eta bakterioak alboko ate txiki batetik sar daitezke.
Gaur egun, teknika aseptikoek ez dute funtsezko zeregina betetzen ikerketa eta aplikazio mikrobiologikoetan bakarrik, baizik eta bioteknologia askotan ere asko erabiltzen dira. Adibidez, teknologia transgenikoa, antigorputz monoklonalen teknologia, etab.
Argitaratze data: 2024ko martxoaren 6a